Microscopy Fluorescence: mataupu faavae o le auala

Mitiia ma toe emission o le malamalama atili vai inorganic ma faatulagaina o le taunuuga o phosphorescence po fluorescence. O le eseesega i le va o le ofoofogia o le umi o le vaitaimi i le va o mitiia ma emission o flux malamalama. Ina ua fluorescence o nei faiga tutupu e toetoe lava taimi e tasi, ao phosphorescence - ma nisi faatuai.

faamatalaga o le talafaasolopito

I le 1852, saienitisi British Stokes, muamua faamatalaina fluorescence. Ia faailoa se vaitaimi fou o se taunuuga o le suesuega ma fluorspar, lea emit malamalama mumu i lalo o le malamalama ultraviolet. matauina Stokes se aafiaga matautia manaia. O loo maua e le wavelength o le e sili atu i taimi uma le leisa fluorescent nai lo le tafe o le malamalama excitation.

Ina ia faamaonia le hypothesis i le senituri lona 19 sa i ai le tele o suesuega. Latou faaalia ai le tele o faataitaiga fluoresce i lalo o le aafiaga o le malamalama ultraviolet. O nisi o mea e faaaoga, faatasi ai ma isi mea, sa taʻega tioata, resins, minerale, chlorophyll, fualaau faasaina masoa, tuufaatasi inorganic, vaitamini, suauu. O le faaaogaina tonu o le dyes mo suega moni o amata le gata i le 1930,

Fluorescence microscopy: faamatalaga

O nisi o mea e faaaogaina i le afa muamua o le suesuega senituri lona 20 faaalia specificity maualuga. стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. Faafetai i le faatinoga, lea e le mafai ona ausia i le faatusatusaina o auala, ua avea ai le auala o le microscopy fluorescence se meafaigaluega taua i le sailiga o biomedical ma moni. Tutusa na maua taunuuga taua, ma mo mea.

? A ni tulaga lelei e le auala o le microscopy fluorescence? Le faaaogaina o mea fou ua avea mafai ma le filifiliga o maualuga feaveai faapitoa vaega submicroscopic. e mafai ona iloa microscopy Fluorescence molecules tasi. A eseese dyes faatagaina le faailoaina o mea e tele i le taimi e tasi. E ui lava i le iugafono spatial faatapulaaina o le tapulaa diffraction o le meafaigaluega, lea, i le taimi, e faalagolago i luga o le meatotino patino o le faataitaiga, o le faailoagofieina o molecules i lalo o lenei tulaga e fai si mafai foi. faataitaiga eseese ina ua uma irradiation faaaliga autofluorescence. Lenei aafiaga matautia ua lautele faaaogaina i petrology, piolosi, o le alamanuia semiconductor.

Features

Suesue aano o le tino po o le faatupu faamai mai fafo manu e masani ona faigata tele pe ua vaivai po o le matua unspecific autofluorescence malosi. Peitai, o le taua i suesuega e maua faatomuaga i le mea vaega fiafia i se wavelength patino ma emitting le malosi tafe malamalama e tatau ai. Fluorochromes galue e avea e dyes mafai ona tutoatasi faapipii fausaga (vaaia pe le vaaia). Sa faapea ona latou maua se selectivity maualuga e le sini, ma le fua quantum.

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ua lautele faaaogaina microscopy Fluorescence talu le afio mai o dyes faalenatura ma gaosi. Latou maua talaaga otooto mautinoa le malosi o le emission ma excitation ma tapulaa fuafuaina i sini moni patino.

Faailoagofieina o molecules tagata

E masani lava, i le tulaga lelei, e mafai ona faamauina se susulu elemene eseese. Mo lenei, faatasi ai ma isi mea, e tatau ona tuuina atu se lava maualalo vavaō o le detector ma le talaaga opitika. molecule Fluorescein i le toilalo ona o photobleaching mafai emit e oo atu i le 300 afe. Photons. I le 20% le lelei aoina o le faagasologa ma e mafai ona faamauina i latou i se aofaiga o le tusa ma le 60 afe.

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. microscopy Fluorescence faavae i solofaga photodiodes po fanafanau faaeletoroni, sa faatagaina e le suesue i le matauina o amioga a molecules tagata taitoatasi e ala i le lona lua, ma i nisi o tulaga e oo lava minute.

lavelave

O se mataupu autu i le finagalo malie o le taofiofia o opitika talaaga leo. Ona o le mea moni o le tele o mea e faaaogaina i le mamanu o le faamama ma lenses faaalia nisi autofluorescence, o le taumafaiga a saienitisi i le laasaga vave sa taulai i le tuuina atu o vaega ua i ai se fluorescence maualalo. Ae peitai, o suesuega mulimuli ane ua taitai atu ai i faaiuga fou. , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. Aemaise lava, sa iloa ai microscopy fluorescence, e faavae i luga o ata i totonu atoa, e mafai ai ina ia ausia a malamalama excitation talaaga maualalo ma le malosi sili.

togafiti

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. O mataupu faavae o microscopy fluorescence, e faavae i luga o ata i totonu atoa o le faaaogaina o evanescent galu pe evanescent. E tupu mai i le tuaoi i le va o ala o faasalalauga ma eseese indices refractive. I lenei tulaga, le utupoto malamalama pasia e ala i le prism. O loo i ai se faasino upu parameter maualuga refractive.

O le prism tulata i le fofo aqueous po o le ipuinu ma parameter maualalo. Afai o se laau faalava o le malamalama faatonuina i ai i se vaaiga e sili atu ona taua, e matua atagia le laau faalava mai le Ofisa. Lenei aafiaga matautia, i le taimi, ua mafua ai galu nonpropagating. I se isi faaupuga, o le fanua eletise faatupulaia lea ati i se auala ma se parameter faasino refractive maualalo i se mamao e itiiti ifo nai lo le 200 nanometers.

Le galu evanescent malosi o le malamalama o le a lava e faaosofia fluorophores. Ae peitai, ona o lona matua laiti loloto, o le a lava le laiti o ona voluma. Le taunuuga o se tulaga maualalo le tulaga.

faʻafetauiga

e faavae microscopy Fluorescence i ata i totonu atoa, e mafai ona faatinoina i epi-malamalama. Lenei mea e manaomia lenses ma aperture fuainumera maualuga (itiiti ifo i le 1.4, ae e manaomia sa oo ina oo 1.45-1.6), ma vaega faamalamalamaina meafaigaluega fanua. ua ausia e le gata i se tamai tele nofoaga. O le laugatasia e sili atu le faaaogaina o se mama manifinifi, ua punitia e se vaega o le alia. Mo le tulimanu taua, ina ua uma o lo oi ai se ata atoa, tatou te manaomia ai se tulaga maualuga o le refraction o le auala i le faatofuina i le tioata ma le faavaa o le tioata o le mikerosekope.