Auala suesuega tau kenera Molecular

Ina ia suesue ma faailoa variants i fausaga DNA faaaogaina metotia tau kenera molecular. Mo itulagi DNA taitasi, lea explores lenei itulagi o le chromosome, Gene po allele, e eseese le auala. Faavae metotia tau kenera molecular taitasi e aofia ai nisi po o isi faiga o RNA ma DNA. Uma nei auala o loo faamatalaina e se lavelave tele, e aunoa ma le mafai ona tauaveina tulaga fale suesue, ma e tatau ona maualuga le agavaa o le aufaigaluega. O lenei ua faia galuega i le tele o vaega.

laasaga

Muamua, RNA po o le DNA faataitaiga ina ia tuuina mai. Iinei, o se e mafai ona faaaoga auala tau kenera molecular e toetoe lava o soo se mea: a mataua o le toto, leukocytes, fibroblasts aganuu, mucosa (saeina), o le follicles lauulu, - e mafai ona maua DNA mai so o se faataitaiga. E talafeagai e faaaoga so o se molecular metotia tau kenera ma a latou filifiliga eseese ma ua leva ona faaesea ua teuina aisa DNA. O le laasaga lona lua o le faapaiaina i le faaputuga o le fragments manao (amplification) o le DNA, e pei ona e fesoasoani ia mautinoa ai le tali filifili polymerase i to faamili (i le to faamili e aunoa ma le aafia o le ola tino). O se taunuuga, o le filifilia multiplies momoimea DNA e lenei tali filifili, ma le aofaiga o moni faateleina DNA faitau miliona o taimi.

O le lona tolu laasaga i le auala molecular suesuega tau kenera e tauaveina tapulaa DNA faateleina (o lenei fragmentation, saeia po vavaeina). Tapulaa faatinoina e electrophoresis i se polyacrylamide po gel agarose. O lenei auala molecular-tau kenera o le suesueina o le momoimea DNA e mafai ai e tagata uma se tulaga e patino i le gel. Mulimuli ane, ua faatatauina le gel ma bromide ethidium, e mafai ona noatia i le DNA, o le irradiation i le malamalama ultraviolet, o lea e mafai ona tausia vaega luminescence. E eseese ma le tele o metotia diagnostic tuufaasolo Molecular, ae o le laasaga muamua e lua o loo taatele i tagata uma. Ae ina ia faailoa fragments DNA, e mafai ona lanu le gel, ma le tele o isi auala o lo oi ai.

ituaiga

O le auala sili ona tuusao ma salalau solo mo le sailia o mycobacteria mafai ona aofia ai le auala e aoao ai DNA tuufaasolo i luga molecular. Lona ute moni e faapea, ina ia faailoa le mea filifili e faitau vave o fragments patino o DNA o faatupu faamai mai fafo. te leʻi metotia diagnostic tuufaasolo Molecular i ai se auala e sili ona lelei ina ia iloa e faamai e pei o le fatafata vaivai. Le faaaogaina o le tali filifili polymerase (PCR), e mafai ona e mautinoa o le a faateleina ai le DNA uluai le aofaiga o kopi i se miliona taimi, o lona uiga, o le a amplification, ma o le a faaali atu le taunuuga. O le tulaga maaleale tulaga e matua maualuga - e sili atu nai lo le ivasefulu-lima pasene, o le lelei autu o lenei metotia.

O le vaega o totoe o le auala molecular-tau kenera o suesuega i le aoga moni o le fua kopi tele faaluaina, talu ai i le tulaga lenei o loo faaalia ai le faataitaiga tusia se faasologa oligonucleotide patino faateleina e tasi le selau ma le ono o taimi. E oo lava i le aganuu auga o le fatafata vaivai tele o le faiga respiratory lalo lona magafagafa. O le mafuaaga lenei ua faavae vailaau po nei i luga o auala tau kenera molecular o auga o le fatafata vaivai. A faamatalaina le auala e faapitoa lava le aoga pe a feagai ai ma faatupu faamai mai fafo o variability antigenic maualuga, fuafuaina e faapea o se isi auala e sili atu le faigata - e manaomia faapitoa o ala o faasalalauga nutrient ma atiina taimi umi. metotia tau kenera Biochemical ma molecular maua aafiaga matua ese lava i le taunuuga.

auga o le fatafata vaivai

auga Marshall PCR o le fatafata vaivai sili ona taatele le faaaogaina o latou DNA sequences e patino mo ituaiga uma e fa o le faamai. Ina ia ausia lenei sini e masani ona faaaoga primers e iloa faasologa O elemene (E-986, O-6110), e pei o nei elemene faavasegaina maualuga migratory ituaiga mamapala Mycobacterium ma taimi uma kopi tele le taimi nei i le genome. Foi e mafai ona tauaveina aveesea mai DNA mai aganuu mama ma le falemaʻi (sputum o gasegase) e ala i so o se isi auala talafeagai. Mo se faataitaiga, ei ai auala Boom lea o loo faaaogaina le buffer lysis e faavae i luga o le guanidine thiocyanate ma silica o le DNA e feaveai. O le aofai o gasegase e ese matitiva bacteriological faateleina tausaga uma, ma o le mea lea i le faiga ua faavaeina togafitiga se tulaga eseese atoatoa o le faalapotopotoga: auala molecular-tau kenera o le suesueina o DNA ua taaalo i se matafaioi autu i le auga.

Ae peitai, e tatau ona tatou tautino atu e le aunoa drawbacks. O le auala PCR o le faaaogaina o le e masani ona aumaia ai se aofaiga tele o taunuuga sese-lelei, ma o le mafuaaga e le gata sese faapitoa, ae faapea foi le vaega o le auala lava. I le faaopoopo atu, i le faaaogaina o lenei auala o le auga e iloa ai le viability o mycobacteria, lea ua faailoa mai, e le na o le mafai. Ae e le o le sili ona taua o lenei tulaga le lelei. metotia tau kenera Molecular o diagnostics PCR manaomia ai le tulaga lamatia o le faaleagaina o DNA mycobacterial. Tusipasi manaoga mo le pogai lea ua mo suʻesuʻega PCR fuafuaina faapitoa malosi, e manaomia ei latou e tolu nofoaga eseese. tekinolosi PCR o ona po nei ma matua lavelave, e manaomia ai le faaaogaina o talafeagai meafaigaluega ma tagata sili-aoaoina.

bacterioscopy

Afai e tatau ona faatusatusa le auga taunuuga o le auiliiliga ma isi faamatalaga: suesuega togafitiga, radiography, nini microscopy, faatoaga e oo lava i se tali i se togafitiga faapitoa matua taua lava. I lenei faasologa, o le na o le tasi suesuega PCR o le vaega. Iloa le faatupu mai i le auga vave e mafai ona avea le auala faigofie ma quickest - bacteriological.

Ua faaaogaina a mikerosekope malamalama (valivali Ziehl-Neelsen) ma fluorescent (valivali fluorochromes). O le lelei o le saoasaoa nini le taunuuga. Ae o lona drawback e saʻo manatu o le tulaga e faatapulaaina ona o le magafagafa maualalo. Ae peitai, ua tuuina mai i lenei auala fautuaga O e pei o le e sili ona tau talafeagai ma le eleele e iloa ai le fatafata vaivai gasegase. Mauaina o mycobacteria auala bacteriological ua taua valoaga ma fuafuaina excretion quantitatively siama. Sili atu ona mautinoa e foʻia ai metotia suesuega tau kenera molecular o le fatafata vaivai.

aganuu

mataituina lelei o mycobacteria iloa aoaoga faaleaganuu. Le luluina o le mea pathological ua faia i le auala fuamoa: Mordovsky, Finn II, LJ, ma faapena. Tagavai o le tetee o mycobacteria i vailaau ma faamaoniga leai foi o le aoga o se aofaiga o mycobacteria ma o latou nofoaga i le to faamili, pe afai o le faaaogaina metotia o le aganuu suesuega. Ina ia faateleina le pasene o le faaesea o mycobacteria inoculation o mea pathological ua faia i le siosiomaga tele.

Le faafetaiaia o manaoga o le tele o aganuu, e aofia ai le faatupu tuuina atu ma le vai. Faaaogaina i lenei faiga ma le ituaiga mitaina otometi tuputupu ae VANTES. e tatau ona faia o Laau Toto i incubation mo le oo atu i le fitu i le valu vaiaso. I lenei taimi e mafai ona iloiloina le lelei le fua ma le le lava o le tuputupu ae. O le auala sili ona lelei e iloa Mycobacterium fatafata vaivai mafaufau faataitaiga moni: diagnostic mea ona puaa Kini, lea e matua aafia i TB.

O nisi o ata

fanua manaia o le suesue, lea sa na tatalaina e diagnostics PCR e suesue le M. fatafata vaivai - siama natia. O le mataupu po nei o siama TB e taʻu mai ai i fafo o le a selau tagata sa i fesootaiga ma M. fatafata vaivai, ivasefulu-e mafai foi ona aafia, ae na o le sefulu o latou e ua atiina ae faamaʻi malosi. Maua e isi puipuiga mausali TB, ma ona ivasefulu pasene o le tulaga e tumau pea le siama natia. Iloa se mamanu ua fesoasoani ai se metotia tau kenera molecular.

Geneticists fai atu limasefulu-lima pasene oi latou o loo latou faatoaga sa lelei mea pathological, ma le valu pasene o tagata aafia i M. le fatafata vaivai, ae tafe ai se faaaliga radiographic o faamaʻi, maua tali lelei PCR. O se auala diagnostic tuufaasolo fesoasoani e faailoa gasegase i se tulaga lamatia e ala i suesuega PCR, faatasi ai ma le taunuuga o le latou iloiloga (microscopy ma le aganuu) sa le lelei, ma subclinical siama M. sa i ai le fatafata vaivai.

suesuega po nei

Le Malo o Rusia ma suʻesuʻega bacteriological faaaoga se auala ua faateleina o concentrations aiai: gaoioiga reductase nitrate o mycobacteria tofotofoina e reagent Griess. nofoaga autu o Aneti-TB faaaoga ai se metotia e mafai ai e fuafua ai le tetee o fualaau faasaina. O lenei seeding i ala o faasalalauga suavai, lea otometi radiometric ma faiga faatausitusi fluorescent tuputupu ae o mycobacteria. O se ua vave faia auiliiliga - e oo atu i le lua vaiaso.

Le taimi nei, o loo atiina ae metotia fou: tetee fualaau faasaina o mycobacteria ua fuaina i le tulaga genotype. Suesuega o le auala molecular o genes tetee ma faaalia ai le afioaga i le mycobacteria. O nei genes o loo fesootai ma tetee atu i fualaau faasaina patino. Mo se faataitaiga, genes kasA, inhA, katG e tetee atu isoniazid, rpoB Gene - genes RNA rifampicin 16Sp ma rpsL - streptomycin, emb1 - e ethambutol, gyrA - a fluoroquinolone ma isi.

mutations

O le auga o aso nei matua faateleina le auala tulaga molecular-tau kenera mo le suesueina o DNA ma faatagaina e tauaveina suesuega tele-fua o mutations i latou o fusi o alaleo uma. O lenei ua tatou iloa o le mutations sili ona taatele i le 516, 526 ma le 531 codons le Gene rpoB, ma faailoa mai le tetee atu i fualaau eseese. E i ai se vaega atoa o metotia mo le taina o mycobacteria le faaaogaina e le gata i auala masani - biochemical, moni ma aganuu, ae faapea foi faaaogaina lautele metotia tau kenera molecular nei. Ua uma ona o loo i ai lava ma tuuina atu le auala auga saʻo mo le mauaina o faamai monogenic. o loo faavae i luga o suesuega DNA i le nofoaga tonu o le a Gene faapitoa. e masani lava o se faagasologa faigata lenei, taimi alu ma le taugata, ae o le faamatalaga ua tuuina atu e le auiliiliga tau kenera molecular, e sili atu le saʻo ma o faamatalaga na i lo le faamatalaga uma isi iloiloga.

Ua leva ona iloa e le suia ai le DNA mo le olaga atoa o le tino e le o i so o se nucleated sela odnakova, ma o lenei ua mafai ai e le auiliiliga o matua sela uma o le tino, i so o se laasaga o ontogeny. O le faaleagaina Gene e mafai ona iloa mai i luma o le faaali mai o le faailoga muamua i le atoatoa-fua faamaʻi togafitiga, faapea foi i tagata heterozygous maloloina, ae ua i ai se mutation i le Gene. Molecular maʻi tuʻufaʻasolo mai i tupuaga tau kenera metotia diagnostic faatagaina e faaali mai lona (auala tuusao, DNA-diagnostics), faapea foi ma iloilo le segregation o le faamai i le aiga ma faailoga DNA loci (polymorphisms tau kenera), lea e fesootaʻi lelei ma se Gene faaleagaina (ie, o le faiga tuusao o DNA-diagnostics). Faiga tuusao pe leai - soo se DNA diagnostics e faavae i luga o le auala o le faailoaina o se vaega faamatalaina matua o le DNA o tagata.

auala tuusao

auala tuusao o DNA auga pe a ua iloa maʻi tuʻufaʻasolo mai i tupuaga le Gene pāgotā, e pei ona lauiloa, ma ituaiga o lona mutations. Mo se faataitaiga, o se auala tuusao talafeagai i le tele o faamaʻi. O lenei chorea a Huntington (faaopoopoga CTG-toe), phenylketonuria (R408W), cystic fibrosis (delF508, mutations tetele) ma faapena. O le lelei tele o le auala tuusao o se sao atoatoa diagnostic atoatoa-e umia, ma e leai se manaomia o le faia o se iloiloga DNA o le vaega o totoe o le aiga. Afai ua maua se mutation i le Gene tutusa, e mafai ai ona faamaonia tonu a auga o āiga, naunautai genotype mo le vaega o totoe o le aiga mafatia.

O le isi faamanuiaga o le tuusao auga ua manatu e faailoa a feaveai ai heterozygous o mutations leaga mai le aiga ma le matua o le na maliu mai le faamai. E moni lava lenei mo autosomal recessive faamai. O loo maua foi tulaga le lelei o metotia tuusao. E faaaoga i latou, e tatau ona e iloa localize tonu le Gene faʻalavelave, fausaga exon-intron o lona fusi o alaleo ma ona mutations. E le faamai monogenic uma i aso nei ua maua sea faamatalaga. e le mafai ona iloiloina auala tuusao Informativeness atoatoa, ona o se tasi ma le le mafai ona i ai Gene lava se aofaiga tele o mutation pathological e mafua ai le atinae o faamai tuʻufaʻasolo mai i tupuaga.

auala faaalatua

Leai foi metotia i diagnostics DNA o loo faaaogaina i mea uma, i le isi tulaga, pe afai o le faaleagaina Gene e le o faailoaina, ae na o chromosomally, po o pe afai e le tuuina mai e le auga laina le taunuuga (e tupu, pe afai o le Gene faalapotopotoga molecular lavelave po o se tulaga tele, pe afai o loo i ai le tele mutations pathological). Leai foi metotia faatinoina iloiloga segregation o faailoga polymorphic i aiga allelic. Faailoga o loo maua i le tasi itulagi po locus chromosomal ua fesootaʻi lelei i le faamaʻi ma sui deletions po insertions, substitutions manatu, toe, ma o latou polymorphism ua tatau ona totogi i aofaiga eseese o le sela i le poloka.

Sili ona talafeagai mo auga leai manatu microsatellite ma minisatellite polymorphisms, ua lautele tufatufaina i le genome tagata. faaalia lo latou taua i le anotusi maualuga faamatalaga, pe afai o le faaleagaina o le mamao tuufaasolo i le va o le faailoga ma le Gene e le tele tele. I le tulaga e gata ai, i le faatatau saʻo ua fuafuaina i se tulaga tele o le taimi o recombination le va o le faailoga polymorphic ma faaleagaina. Leai foi metotia diagnostic foi ona maua ai laasaga amata faamalosia o alaleo allele o le suesuega o le faitau aofai iloiloina i gasegase ma feaveaʻia o mutations, faaopoopo i ai ma le manaomia o le fuafuaina o le avanoa o recombination o nonequilibrium ma adhesion faailoga ma alleles mutant.

isi metotia

vaega puupuu o RNA po o le DNA, faapea foi e tasi Gene vaai faalemafaufau i lalo o suesuega microscopic le mafai ona i ai, o le mea lea, e faailoa mutations manaomia e auga tuufaasolo molecular. O loo i ai se "Tagata Genome Atinae", faapea foi ma isi aitalafu i kenera molecular matua faalauteleina ai le avanoa o le auga o le faamai tuʻufaʻasolo mai i tupuaga - uma ¯ ma postnatal. O nei metotia e mafai ona maua mauaina vave ma faia se valoaga faamai poly- ma monogenic, o lona debut faia i matua. Ae paga lea, ona o le mafai gafatia faapitoa o suesuega tau kenera molecular o nisi taimi e sili atu nai lo le tapulaa o le tauleleia o loo faatulaga e faasino i tofi, aemaise lava pe a le auga o i talavou ma le olaga faatamaitiiti.

abnormalities fausaga ma fuainumera chromosomal o le mafuaaga taatele o faamaʻi ma le kanesa, ma le tele malformations. manaomia aberrations Chromosomal ai ona faailoa, lea e taua mo le fautuaina o le aiga - e iloilo ai le vaaiga tuutuumamao, faatasi ai ma tulaga lamatia fanautama i maitaga lumanai. Chromosome auiliiliga o le "tagavai auro" o le auga tau kenera, ae e faatapulaaina. E na o le auala o auiliiliga tau kenera molecular mafai ona e faia e sili atu, aua o le faaaogaina o tekinolosi cloning faavae igoa fluorescent mafai ona latou nofouta maualuga e faailoa suiga maaleale chromosomal e le mafai ona iloa uluaʻi suesuega cytogenetic. O nei metotia o loo faateleina le faalauteleina o lo tatou gafatia diagnostic, pe a suesueina, o fanau ei ai manaoga faapitoa atinaʻe, retardation le mafaufau, ma le tele o isi faamai tuʻufaʻasolo mai i tupuaga.

sailiiliga

E taua tele mo tagata sa le Gene fausaga ma galuega tauave o le malamalama, o ituaiga o variability, le tomai e iloa faamai tuʻufaʻasolo mai i tupuaga na tutupu e tusa ai ma le atinae o kenera molecular. o loo taulai atu ana metotia i le suesueina o le molecule DNA - ma pe a masani, ma ina ua faaleagaina. Sauniuniga o sequences acid deoxyribonucleic o nucleotides (DNA) e oo atu i laasaga mai le mauaina o faataitaiga e faailoa fragments tagata taitoatasi. Faaesea o DNA genomic mai le sela, tapulaa (saeia), amplification (cloning), electrophoresis o le fragments (vavaeeseina o latou totogi eletise ma mamafa molecular e gel agarose). Faailoagofieina o fragments faapitoa o loo i luga o se mua motu.

Ona maua i le gaoioiga faamama faapitoa, lea ua pasia hybridization momoimea taitasi i cloned DNA fragments po probes faʻaratiasia gaosi o se pulea, lea o le a tutusa ai o ia faataitaiga o suega taitasi. Afai e te suia le tulaga po o le uumi faatusatusa i le suʻesuʻega, pe afai o se momoimea fou pe mou - fautuaina lenei uma ua faatino vaaiga e ese le Gene iloiloina i le faasologa nucleotide. E auala faavae e valu o suesuega tau kenera molecular: sequencing (faaiuga o le faasologa DNA), tali filifili polymerase (siitia o le numera o sequences), o le sauniuniga o primers iloa genes, DNA cloning, tuuina atu o molecules recombinant maua polotini ona molecules recombinant, fatuina o se seti atoatoa (aoina faletusi) cloned fragments na maua e ala i le faaaogaina o tapulaa.